植物组培实验室建设：培养用具灭菌方式SICOLAB

一、植物组培实验室建设组成

组织培养实验基于对无菌条件的严格要求，由准备室、缓冲间、无菌室、培养室和炼苗室四部分组成。

二、植物组织培养的基本步骤SICOLAB

成熟细胞离体—(脱分化)一分生细胞—(分裂)—愈伤组织—(再分化)一形态建成—完整植株。

三、培养基和组织培养用具的灭菌方式

[培养基,无菌水]高压蒸汽灭菌 , 0.105MPa灭菌15~30分钟

[移栽基质]曝晒,甲醛熏蒸或高压蒸汽灭菌0.14MMPa灭菌1~2h

[接种室,缓冲室]紫外线灯照射30min ,或气雾消毒剂

[超净工作台]紫外线灯30min ,之后打开风机过滤除菌

[外植体]不同的化学消毒剂浸泡消毒

[接种工具] 70%乙醇浸泡或擦拭,之后用火焰灼烧灭菌

[培养室] 3%来苏尔喷雾,或甲醛,气雾消毒熏蒸

[皮肤]先用肥皂洗手,接种前用70%乙醇擦拭

[瓶口,管口] 70%乙醇擦拭,用火焰封口

[培养瓶表面] 70%乙醇擦拭

[台面,桌面] 70%乙醇擦拭或喷雾消毒

四、植物组培实验室建设：植物外植体灭菌方式SICOLAB

[茎尖,茎段，叶片] 1.用70%Z醇浸泡30秒,再用无菌水冲洗1次。

2.用 2%次氯酸钠浸泡15min或0.1%升汞浸泡5~10min。

3.若材料有绒毛,最好在消毒液中加入几滴吐温。

4.  消毒时要不断震荡,使植物材料与消毒剂充分接触。

5. 最后用无菌水冲洗3~5次。

[果实] 1.用乙醇迅速漂洗–下,再用无菌水冲。

2.  用2%次氯酸钠浸泡10min ,用无菌水冲洗2~3次。

[种子]用10%次氯酸钠浸泡20~ 30min ,或0.1%升汞消毒5~ 10min ,然后再用无菌水冲洗3~5次。

[花蕾] 1.用70%乙醇浸泡10~15秒,无菌水冲洗–次。

2.在漂白粉中浸泡10min ,用无菌水冲洗2~3次。

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