抗生素车间菌种室设计SICOLAB（案例分享）
一、前言
随着世界经济一体化的渐渐形成，我国各行各业与国际接轨正紧张进行着，八十年代以来，各种认证：ＧＭＰ、ＦＤＡ、ＩＳＯ９００１等对制药企业进行着一遍遍的洗礼，但它们似乎都忽略了抗生素企业的一个重要环节一茵种室。试想如果没有一个洁净合理的菌种操作环境，如何能保证高质量的种子，没有高质量的种子更不能保证抗菌素的高技经指标。本文SICOLAB旨在探讨如何设计高标准的菌种室，并呼吁广大抗生素车间设计人员，在重视制药企业设计符合ＧＭＰ要求的同时，不要忽略了菌种室。
二、优质种子的制备要想使菌种室设计得合理，首先应了解菌种是如何制备的。一般抗生素菌种都有两种功能：一是保障提供生产用优质种子，二是做试验，筛选单位更高的菌种。因此必须有两套无菌室，一套用于生产，一套用于试验选种，二者不可混淆，以免影响生产。抗生素菌种的筛选是一项复杂而细致的工作，想得到生产上用的优质种子，必须要经过严格的菌种选育工作。
1、优质种子必须具备下列五项条件：
（１）菌种细胞的生长活力强，移种到发酵罐后能迅速生长以缩短迟滞期；
（２）生理状态稳定，以使得到稳定的菌体生长过程；
（３）具有适宜的菌体总量及浓度以能满足大容量发酵的要求；
（４）无杂菌污染，以确保整个发酵过程正常进行；
（５）保持稳定的生产能力，使最终产物的生物合成量持续稳定高产。
2、要想获得如上所述的优质种子，则必须具备如下五种条件：
（１）有一种能使保存的菌种转移到存活力能达到最大的复活培养基上的方法；
（２）有一个不引起种子染菌的接种场所；
（３）具有定量判断种子质量标准的方法；
（４）具有定量测定菌种一系列生理状态变化的方法，以能正确地反映生物物质的连续变化；（５）选择能满足种子扩大培养的容器和其它环境条件。下面为以霉菌为例的菌种工艺流程图。霉菌类孢子的培养多数采用大米、小米、麦麸等天然培养基。首先将保存于沙土管中的菌种抱子接种在双碟平皿上，恒温培养，待孢子成熟后制成孢子悬浮液，然后接种到大米或小米等培养基上，培养成熟后成为“亲米”，由“亲米”再转到大米或小米培养基上，培养成熟后称为“生产米”，用“生产米”接入种子罐内，“亲米”和“生产米”的培养温度一般为２５～２８℃，培养时间随菌种不同而异，一般为４～１４天。为了使通气均匀，在培养过程中要注意翻动。按一定接种量接人发酵瓶，模拟生产过程的试验，可以摸索菌种生长代谢的最佳工艺条件，并筛选活性最高的菌种保存备用。制备好的大米或小米抱子，可放在５℃冰库中保存备用，或将大米或小米抱子用真空抽干滚砂留种，这种干燥抱子菌种可在生产上连续使用半年左右，这对稳定生产很有好处。在制备霉菌池子时，根据经验通过显微镜数抱子数，挑选合适的１０倍系列稀释抱子悬液，以使平皿生长的菌落尽可能分散，以每皿２－３个为最理想。菌落一般长至直径８～１０ｔｕｒｎ为适，接种时应选取中央丰满部分的抱子，不要触及菌落边缘的菌丝。制备大米抱子时，抱子悬浮液的浓度要适当，应根据菌种特性来决定适当浓度。接种使用后的吸管随即插人肉汤内浸一下作无菌检查。当接种完毕后，应将大米等固体培养基敲翻一次，使抱子悬浮液同培养基混合均匀，待抱子成熟后移至５℃冰箱或冰库中保存备用。
3、菌种定平面布置设计及注意事项下图为依据ＧＭＰ规范所设计的菌种室平面布置图（见图２）。
３．１在设计中应注意如下问题：
（１）一般菌种室都设置在发酵生产车间种子罐操作平面上，如确因空间紧张，也可移至低一层平面。
（２）根据ＧＭＰ要求万级洁净房间需。经更衣，并淋浴后进人，而且要有与万级洁净区相适应的洗衣房、洁具及洁具清洗间（淋浴室可根据实际情况确定是否设置）。
（３）凡万级洁净室墙壁需耐清洗消毒的壁板，门窗为不锈钢或彩钢板，地面采用水磨石，各种阴阳角均为圆弧状。
（４）万级洁净室送风要单独成一系统，以免其它岗位的回风污染无菌室的环境。临性产、试验用无菌室分别单独设置，确保生产、试验两不误，无菌室内放置双人超净工作台以提供局部百级的无菌操作空间。
（5）摇瓶间是接种后种子扩大培养的地方，培养时间一般较长，而且根据菌种特性还需补料，进出操作频繁，因而单独设置。
（6）恒温室分为两类，以霉菌培养为例，一类用于菌种传代或扩大培养，温度２５士０．５℃，湿度５０％士５％，摇瓶间即属于此类恒温室。另一类用于无菌检查，温度３７ｔ０．ｓｔ，湿度５０％ｔ５％，为方便操作，无菌室和恒温室均由双层玻璃隔断与操作间隔开。
（7）为了给生产准备优质种子和筛选高单位茵种，菌种室每天都要配制不同类型的培养基，用到许多天然培养基和化学试剂，各种三角瓶、试管、平皿等玻璃器皿更是数以千计，还有其它辅助材料，如棉花、纱布、牛皮纸、滤纸等，因而设置了试剂库和材料库。
（8）以制备霉菌抱子为例，待米抱子成熟后，放人真空干燥器中抽干，然后由双扉消毒框传人无菌室滚砂留种。消毒柜用于无菌室所用物品的消毒灭菌。
（9）制备好的砂上抱子或生产抱子，放入冰库中保存备用。冰库为装配式，配有专用的冷气机，既保温又洁净。
（10）仪器室内设有光电天平、显微镜。自动效价测试等精密仪器。
四、SICOLAB案例总结
菌种室是抗生素发酵车间至关重要的一个环节，菌种室的设计要依据菌种制备工艺流程的特点，万级洁净室要符合ＧＭＰ要求，这样才能使菌种室布置得合理有序，确保为生产提供优质种子。
SICOLAB【二级施工资质】实验室设计、建设、装修、改造、通风、净化、水电气、三废处理，实验室家具设计生产安装一站式。